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我们为什么要研制寡克隆抗体作为二抗用于实验检测

寡克隆抗体是一组单克隆抗体,作为二抗,它适用于以大鼠或小鼠为一抗的实验,相对于普通二抗,它有着更明显的优势。

我们研发寡克隆抗体作为二抗的原因:
1.减少由于使用多克隆抗体作为二抗造成的实验结果高背景
    在几种情况下,大鼠和小鼠的免疫球蛋白会同时存在。例如,大鼠单克隆抗体常作为一抗用于检测小鼠表达的蛋白,在此蛋白中,常常可能混有一些小鼠免疫球蛋白。另外,在一些研究共定位的双染实验中,大鼠抗体和小鼠抗体经常一起使用。为了避免实验结果存在高背景,用于实验检测的二抗不能同时识别大鼠和小鼠一抗。但是目前的市售二抗大部分是多克隆抗体,多克隆抗体为了避免同时识别大小鼠一抗的交叉反应问题,需进行预吸收步骤,以除去能够识别小鼠或大鼠的抗体。
寡克隆抗体不会识别自身种属的抗体,因此,使用它作为二抗,会减少或避免由于二抗与不同种属一抗交叉反应导致的实验结果高本底问题。

2.与多克隆抗体一致的高灵敏度
    多克隆抗体较单克隆抗体有着更高的灵敏度,因为多克隆抗体可识别抗原上的多个抗原决定簇,而单克隆抗体只能识别单一抗原决定簇。我们研制的寡克隆抗体包括一系列的单克隆抗体,因此它也和多克隆抗体一样,可以识别多个抗原决定簇,这一特性保证了其具有高灵敏度。

3.减少在使用多克隆抗体时遇到的批间差异问题
    多克隆抗体直接来源于免疫动物,而每只动物的免疫应答千差万别,因此多克隆抗体多会产生批间差异。我们生产的寡克隆抗体是由细胞培养提纯出的单克隆抗体混合而成的。只要我们能保证抗体浓度,就不会产生批间差异问题。

                     寡克隆抗体与多克隆抗体作为二抗的比较

         图1.使用寡克隆抗体和多克隆抗体作为二抗检测大鼠IgG及小鼠IgG的ELISA结果

         图2.使用寡克隆抗体作为二抗检测大鼠IgG及小鼠IgG的Western blotting结果

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